எத்தனால் மழைப்பொழிவு புரதத்தை அகற்றுமா?

2023 நூலாசிரியர்: Miles Stephen | [email protected]. கடைசியாக மாற்றப்பட்டது: 2023-09-01 09:48

ஃபீனால் குளோரோஃபார்ம் பிரித்தெடுத்தல் (பார்க்க கிர்பி, 1957), பொதுவாக பின்பற்றப்படுகிறது எத்தனால் மழைப்பொழிவு , என்பது பாரம்பரிய முறை புரதத்தை அகற்றவும் ஒரு இருந்து டிஎன்ஏ மாதிரி. நீரில் கரையக்கூடியது டிஎன்ஏ நீர்நிலை கட்டத்தில் பகிர்வுகள், அதே நேரத்தில் புரதங்கள் கரிம கரைப்பான்கள் முன்னிலையில் denature, இதனால் கரிம கட்டத்தில் தங்கி.

அதேபோல, எத்தனால் புரதத்தை உறிஞ்சுகிறதா?

எத்தனால் மழைப்பொழிவு SDS மற்றும் பிறவற்றை அகற்றுவதற்கான ஒரு முறை மது இருந்து கரையக்கூடிய அசுத்தங்கள் புரத குறைந்தபட்சம் கொண்ட மாதிரிகள் புரத இழப்பு. இந்த அறிக்கை விசாரிக்கிறது புரத பிறகு மீட்பு எத்தனால் மழைப்பொழிவு அத்துடன் தி கரையும் தன்மை 90% குளிரில் SDS எத்தனால் .

பின்னர், கேள்வி என்னவென்றால், நீங்கள் எத்தனால் மழைப்பொழிவை எவ்வாறு செய்கிறீர்கள்? அடிப்படை செயல்முறை உப்பு மற்றும் எத்தனால் அவை அக்வஸ் கரைசலில் சேர்க்கப்படுகின்றன மழைப்பொழிவு கரைசலில் இருந்து வெளியேறும் நியூக்ளிக் அமிலங்கள். பிறகு மழைப்பொழிவு நியூக்ளிக் அமிலங்கள் முடியும் பின்னர் மையவிலக்கு மூலம் மீதமுள்ள கரைசலில் இருந்து பிரிக்கப்படும்.

எத்தனால் மழைப்பொழிவு இலவச நியூக்ளியோடைடுகளை அகற்றுமா?

பீனால்-குளோரோஃபார்ம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் எத்தனால் மழைப்பொழிவு க்கு அகற்றுதல் புரதங்கள் மற்றும் பெரும்பாலானவை இலவச நியூக்ளியோடைடுகள் , பீனால்: குளோரோஃபார்ம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் எத்தனால் மழைப்பொழிவு ஆர்என்ஏ டிரான்ஸ்கிரிப்டுகள் விருப்பமான முறையாகும்.

டிஎன்ஏவில் இருந்து ஆர்என்ஏ எவ்வாறு அகற்றப்படுகிறது?

ஆர்.என்.ஏ 20 மைக்ரோலிட்டருக்கு RNase A (10 mg/ml, Fermentas) 2 மைக்ரோலிட்டர் சேர்ப்பதன் மூலம் மாசுபாட்டை அகற்றலாம். டிஎன்ஏ TE பஃபரில் கரைந்து (Tris–EDTA, pH = 8.0) மற்றும் 37 C இல் 3-4 மணிநேரம் அடைகாக்கும்.